Meio 199 (Earle) - 500 Ml
Código: 16535
DEFINIÇÃO: É uma mistura de sais enriquecidos com aminoácidos, vitaminas e outros componentes essenciais para o crescimento celular.
AÇÃO: Age como uma solução nutritiva em cultivo celular.
INDICAÇÃO: Destina-se a cultura de células humanas e de outros animais. Este meio é fornecido na forma líquida e em pó. Na forma em pó, ele tem a vantagem de se manter estável por mais de 24 meses se conservado bem fechado e em geladeira. Outra grande vantagem do meio em pó é a constância de resultados quando se programam culturas celulares a longo prazo, utilizando nesse caso um mesmo lote. O MEIO 199 por ser pobre em ácido fólico é mais utilizado para pesquisa do sítio frágil do cromosso X, além disso ele apresenta uma infinidade de vitaminas que facilitam o metabolismo celular.
VANTAGENS: Testado em pelo três linhagens diferentes, sendo sempre determinado o seu pH e osmolaridade, cada lote só é liberado se estiver dentro dos limites adequados, além de promover um ótimo crescimento celular.
CARACTERÍSTICAS FÍSICO-QUÍMICAS:
-Aspecto : pó róseo e homogêneo
-Tamanho das partículas: aproximadamente 20 microns
-Solubilidade:solução límpida na concentração de uso (1x)
-pH à 25°C (sem NaHCO3) : 4,12 + 0,5
-pH à 25°C (com NaHCO3) :7,40 + 0,5
-Osmolaridade (sem NaHCO3) : 250 + 5%
-Osmolaridade (com NaHCO3) : 290 + 5%
CONSERVAÇÃO: Estocar o meio em pó ou o preparado líquido entre 2 a 6°C. Se essas condições não forem mantidas poderão ser observadas alterações do tipo:
1. Mudança de cor
2. Granulações
3. Insolubilidade
4. Alteração de pH
5. Incapacidade de manter a integridade sob condições normais.
PREPARAÇÃO: O MEIO 199 em pó é extremamente higroscópico devendo ser protegido do meio ambiente. Não são recomendadas preparações de concentrações maiores que aquelas especificadas devido a grande possibilidade de formação de precipitados.
1. Medir aproximadamente 90% do volume a ser preparado de água tridestilada (15-20°C).
2. Adicionar lentamente o pó sob agitação constante. NÃO AQUEÇA A ÁGUA.
3. Depois que o pó estiver totalmente dissolvido, acrescentar por litro 2,2g de bicarbonato de sódio 5,6%.
4. Acrescentar antibióticos ou outras substâncias que julgar necessário.
5. Poder-se-á acertar o pH conforme o desejado, utilizando-se HCl 1N ou NaOH 0,1N, ou ainda gaseificando-se com CO2.
Completar o volume com água tridestilada e esterilizar por filtração em membranas de 0,22m, utilizando pressão positiva.
APRESENTAÇÃO: PÓ - Frascos com pó para preparo de 1, 10 e 50 litros.
LÍQUIDO - Frasco com 100 ou 500 ml.
CONSERVAÇÃO: 2 à 6°C
VALIDADE: 12 meses
Observação: Fabricado e vendido na apresentação mínima de 1 litro (2 frascos com 500 ml)