O Ágar C.L.E.D. com azul de bromotimol é recomendado para isolamento, enumeração e identificação de patógenos urinários

com base na fermentação da lactose.

Composição** Ingredientes Gms / Litro

Peptona 4.000

Tryptone 4.000

HM Peptona B # 3.000

Lactose 10.000

L-cistina 0,128

Azul de bromotimol 0,020

Ágar 15.000

PH final (a 25 ° C) 7,3 ± 0,2

** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho.

# - Equivalente ao extrato de carne bovina

Instruções

Suspenda 36,15 gramas em 1000 ml de água destilada.

Aqueça até ferver para dissolver completamente o meio.

Esterilize em autoclave a pressão de 15 libras (121°C) por 15 minutos.

Arrefecer até 45-50°C.

Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.

Princípio e Interpretação

Em meio sólido, Sandys relatou que o enxame de espécies de Proteus pode ser controlado

restringindo os eletrólitos. Anteriormente, o enxame de Proteus era controlado pela adição de

álcool, agente tensoativo, azida de sódio, ácido bórico etc. ao meio. Posteriormente, o meio

Sandys foi modificado por Mackey e Sandys, substituindo o manitol por lactose e sacarose e

elevando a concentração de ágar e azul de bromo-timol. Esta formulação foi posteriormente

modificada pelos mesmos autores, denominados C.L.E.D. (Deficiente em eletrólitos de cistinalactose)

excluindo a sacarose e incluindo a L-cistina para promover o crescimento de

coliformes anões dependentes de cistina. Este meio é recomendado para uso em bacteriologia

urinária, promovendo o crescimento de todos os patógenos urinários. C.L.E.D. O meio também é

recomendado para procedimentos com vareta de imersão e como meio de transporte de inoculo

por imersão para amostras de urina.

Peptona, triptona e HM A peptona B fornece compostos nitrogênicos e carbonáceos,

aminoácidos de cadeia longa, vitaminas e outros nutrientes essenciais para o crescimento. A

lactose é o açúcar fermentável. A cistina apoia o crescimento da colônia anã coliforme. O azul

de bromo-timol é o indicador de pH que fica amarelo em pH ácido.

A bacteriúria pode ser quantificada inoculando a superfície de um meio de agar por diluição

adequada. Inocule o meio imediatamente após a coleta de urina. Também pode ser inoculado por

métodos de loop calibrado ou duplicação por placa de diluição.

Tipo de amostra

Amostras clínicas - urina

Coleta e manuseio de amostras: Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o

manuseio das amostras, de acordo com as diretrizes estabelecidas. Após o uso, os materiais

contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

Aviso e precauções:

Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção /vestuário de proteção/proteção

ocular/proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear

amostras e cultura. As precauções padrão, de acordo com as diretrizes estabelecidas, devem

ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser

consultadas nas fichas de dados de segurança individuais.

Limitações:

1.Iniciação à antibioticoterapia, antes da coleta da amostra, baixo pH da urina (menos de 5), etc.,pode resultar em baixa contagem bacteriana de pacientes infectados.

2. As espécies de Shigella podem não crescer neste meio.

Desempenho e Avaliação

O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção da etiqueta dentro

do prazo de validade, quando armazenado na temperatura recomendada.

Controle de qualidade

Aparência: Creme para amarelar pó homogêneo de fluxo livre

Gelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%

Cor e clareza do meio preparado

Forma de gel de cor verde clara a ligeiramente opalescente em placas de Petri.

Reação: Reação de solução aquosa a 3,61% p/v a 25°C. pH:7,3 ± 0,2

pH: 7,10-7,50

Resposta cultural

Características culturais observadas após uma incubação a 35-37°C por 18-24 horas.

Resposta cultural

Organismo: Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*)

Inoculação: 50-100

Crescimento: Bom-Exuberante

Recuperação: >=70%

Cor da Colônia: ligeiramente amarelado ou esverdeado

Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)

Inoculação: 50-100

Crescimento: Bom-Exuberante

Recuperação: >=70%

Cor da Colônia: amarelo opaco, ligeiramente amarelo mais profundo no centro

Organismo: Klebisiella pneumoniae ATCC 13883 (00097*)

Inoculação: 50-100

Crescimento: Bom-Exuberante

Recuperação: >=70%

Cor da Colônia: amarelo a azul esbranquiçado

Organismo: Proteus vulgaris ATCC 13315

Inoculação: 50-100

Crescimento: Bom-Exuberante

Recuperação: >=70%

Cor da Colônia: Azul

Organismo: Salmonella Typhi ATCC 6539

Inoculação: 50-100

Crescimento: Bom-Exuberante

Recuperação: >=70%

Cor da Colônia: Azul

Organismo: Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*)

Inoculação: 50-100

Crescimento: Bom-Exuberante

Recuperação: >=70%

Cor da Colônia: Amarelo profundo

Chave: *Números correspondentes do WDCM.

Armazenamento e prazo de validade:

Armazenar entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 20-30°C. Use

antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser adequadamente

armazenado seco, após fechar firmemente o frasco para evitar a formação de caroços devido

à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à

formação de caroços.

Armazenar em área ventilada seca e protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição.

Fechar o recipiente firmemente após o uso. Use antes da data de validade no rótulo.

O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.

Descarte: O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração de

preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Siga os procedimentos laboratoriais

estabelecidos no descarte de materiais infecciosos e o material que entrar em contato com a

amostra clínica deve ser descontaminado e descartado de acordo com as técnicas laboratoriais

atuais.

* Imagem meramente ilustrativa