Ágar Contagem de Placas (Métodos Padrão de Ágar) - M091

Recomendado para a determinação de contagem de placas de microrganismos em alimentos,

água, águas residuais e também de amostras clínicas.

Composição**

Ingredientes g/L

Triptona 5.000

Extrato de levedura 2.500

Dextrose (Glicose) 1.000

Ágar 15.000

pH final(a 25°C) 7,0 ± 0,2

**Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho.

Instruções

Suspenda 23,5g em 1000mL de água purificada/destilada. Aqueça até a fervura para dissolver

o meio completamente. Esterilize em autoclave a 15 lbs de pressão (121°C) por 15 minutos.

Esfriar a 45°C - 50°C. Misture bem antes de despejar em placas de Petri estéreis.

Princípio e Interpretação

O Ágar de Contagem de Placas é formulado conforme descrito por Buchbinder et al (2), que é

recomendado pela APHA (1,6,7) e FDA (3). Triptona fornece compostos nitrogenados e

carbonáceos, aminoácidos de cadeia longa e outros nutrientes essenciais. O extrato de

levedura fornece o complexo de vitamina B. A APHA recomenda o uso da técnica de vazamento

em placa. As amostras são diluídas e diluições apropriadas são adicionadas em placas de Petri.

Ágar fundido estéril é adicionado a essas placas e as placas são giradas suavemente para

garantir a mistura uniforme da amostra com ágar. O método de contagem em placa derramada é

preferível ao método de inoculação de superfície, uma vez que dá resultados mais elevados. O

ágar de contagem de placas também é adequado para enumerar a contagem bacteriana de

salas estéreis.

Tipo de espécime

Amostras clínicas - sangue; amostras de alimentos e laticínios; amostras de água.

Coleta e manuseio de amostras

Para amostras clínicas, alimentos e laticínios e amostras de água, siga as técnicas apropriadas

de coleta e processamento de amostras de acordo com as diretrizes e padroes locais.

Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem

descartados.

Aviso e precauções

Uso para diagnóstico In Vitro. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção/

roupas de proteção/ proteção de olhos/ proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório

microbiológico ao manusear amostras e cultura. As precauções padrão de acordo com as

diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As

diretrizes de segurança podem ser referidas em fichas de dados de segurança individuais.

Limitações

Este meio é um meio de uso geral e pode não suportar o crescimento de microrganismos

fastidiosos.

Desempenho e avaliação

O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a instrução do rótulo dentro

da temperatura recomendada.

Controle de qualidade

Aparência: Pó de fluxo livre homogêneo de creme a amarelo

Gelificação: Firme, comparável ao gel de ágar a 1,5%.

Cor e clareza do meio preparado: Formas de gel amarelo claro a ligeiramente opalescente em

placas de Petri.

Reação: Reação de 2,35% p/v em solução aquosa a 25°C. pH: 7,0 ±0,2

pH: 6,80-7,20

Resposta cultural

Características culturais observadas após uma incubação a 35°C -37°C durante 18-24 horas.

Organismo: Bacillus subtilis subsp. spizizenni ATCC 6633 (00003*)

Inoculação: 50-100

Crescimento: Exuberante

Recuperação: >=70%

Organismo: Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*)

Inoculação: 50-100

Crescimento: Exuberante

Recuperação: >=70%

Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)

Inoculação: 50-100

Crescimento: Exuberante

Recuperação: >=70%

Organismo: Lactobacillus casei ATCC 9595

Inoculação: 50-100

Crescimento: Exuberante

Recuperação: >=70%

Organismo: Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*)

Inoculação: 50-100

Crescimento: Exuberante

Recuperação: >=70%

Organismo: Streptococcus pyogenes ATCC 19615

Inoculação: 50-100

Crescimento: Exuberante

Recuperação: >=70%

-Chave: *Números WDCM correspondentes

Armazenamento e prazo de validade

Armazenar entre 10°C e 30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado entre 20°C e

30° C. Use antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser devidamente

armazenado seco, após tampar bem o frasco para evitar formação de grumos devido à

natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à

formação de caroços. Armazenar em área ventilada e seca protegida de extremos de

temperatura e fontes de ignição. Selar o recipiente hermeticamente depois de usar. O

desempenho do produto é melhor se usado dentro do período de validade declarado

Disposição

O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclavagem e/ou incineração das preparações

usadas ou inutilizáveis deste produto. Seguir procedimentos laboratoriais estabelecidos para o

descarte de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra devem ser

descontaminados e descartados de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (4,5).

* Imagem meramente ilustrativa