Agar Mueller Hinton - 100 Gr - Himedia
Código: 19967
Ágar Mueller Hinton (M173)
Recomendado para determinação da suscetibilidade de microrganismos a agentes
antimicrobianos isolados de amostras clínicas.
Composição**
Ingredientes Gms / Litro
Infusão HM B de # 300.000
Acicase ## 17.500
Amido 1.500
Ágar 17.000
PH final (a 25 ° C) 7,3 ± 0,1
** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho.
# - Equivalente à infusão de carne bovina de
## - Equivalente ao hidrolisado de caseína ácida
Instruções
Suspenda 38,0 gramas em 1000 ml de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver
completamente o meio. Esterilize em autoclave a pressão de 15 libras (121 ° C) por 15 minutos.
Arrefecer até 45-50 ° C. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.
Nota: O desempenho deste lote foi testado e padronizado de acordo com os protocolos M6 do
documento CLSI (anteriormente, NCCLS) atual para avaliação do ágar Mueller Hinton
desidratado.
Princípio e Interpretação
A formulação de Mueller Hinton foi originalmente desenvolvida como um meio de ágar simples e
transparente para o cultivo de espécies patogênicas de Neisseria. Outros meios foram
desenvolvidos posteriormente, substituindo o uso do ágar Mueller Hinton no cultivo de espécies
patogênicas de Neisseria, mas se tornou amplamente utilizado na determinação da resistência
às sulfonamidas dos gonococos e outros organismos. O ágar Mueller Hinton agora é usado
como meio de teste para testes de susceptibilidade a antimicrobianos. Mueller Hinton Agar
recomendado para a difusão de agentes antimicrobianos impregnados em disco de papel
através de um gel de agar tal como descrito em CLSI Approved Standard. O Mueller Hinton Agar
foi selecionado pelo CLSI por vários motivos:
Eu. Demonstra boa reprodutibilidade de lote para lote para testes suscetíveis.
- É pobre em inibidores de sulfonamida, trimetoprim e tetraciclina.
iii. Apoia o crescimento da maioria dos patógenos bacterianos não exigentes e
- Muitos dados e muita experiência em relação ao seu desempenho foram registrados.
Kirby-Bauer et al recomendaram este meio para a realização de testes de suscetibilidade a
antibióticos usando um único disco de alta concentração. O Comitê de Padronização da OMS
para a padronização dos testes de suscetibilidade aceitou o ágar Mueller Hinton para determinar
a suscetibilidade dos microrganismos devido à sua reprodutibilidade. O ágar Mueller Hinton com
5% de sangue de ovelha e o ágar Mueller Hinton com hemoglobina foram recomendados para
testes de sensibilidade a antimicrobianos de Streptococcus pneumoniae e Haemophilus
influenzae.
A infusão de HM B e a acicase fornecem compostos nitrogenados, carbono, enxofre e outros
nutrientes essenciais. O amido atua como um colóide protetor contra substâncias tóxicas
presentes no meio. A hidrólise do amido produz dextrose, que serve como fonte de energia.
Estes ingredientes são selecionados para um baixo teor de timina e timidina, conforme
determinado pelos valores de MIC para Enterococcus faecalis com sulfametoxazoletrimetoprim
(SXT).O procedimento de Kirby-Bauer baseia-se na difusão em ágar de substâncias
antimicrobianas impregnadas em discos de papel. Este método emprega discos com uma única
concentração de agente antimicrobiano e os diâmetros de zona observados estão
correlacionados com os valores de concentração inibitória mínima (CIM). Uma suspensão
padronizada do organismo é esfregada em toda a superfície do meio. Os discos de papel
impregnados com quantidades específicas de agentes antimicrobianos são então colocados na
superfície do meio, incubados e as zonas de inibição ao redor de cada disco são medidas. A
suscetibilidade é determinada pela comparação com os padrões CLSI.
Os vários fatores que influenciam os testes de suscetibilidade à difusão de disco são
profundidade do ágar, potência do disco, concentração do inóculo, pH do meio e produção de
beta-lactamase pelos organismos testados. O Ágar Mueller Hinton não é apropriado para o
ensaio pelo método de difusão em disco com organismos de crescimento lento, anaeróbios e
capnófilos. Com organismos de crescimento lento, o aumento da incubação pode causar
deterioração do antibiótico difuso e produzir leituras imprecisas.
Tipo de amostra
Amostras clínicas: culturas puras isoladas da urina, fezes, sangue etc.
Coleta e manuseio de amostras
Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio das amostras, de acordo
com as diretrizes estabelecidas.
Aviso e Precauções
Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção / roupas de proteção / proteção
para os olhos / proteção para o rosto. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao
manusear amostras e cultura. As precauções padrão, de acordo com as diretrizes
estabelecidas, devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de
segurança podem ser consultadas em folhas de dados de segurança individuais.
Limitações
Este meio é recomendado apenas para testes de suscetibilidade de culturas puras.
A densidade do inóculo pode afetar o tamanho da zona. Inóculo pesado pode resultar em zonas
menores ou menos inóculo pode resultar em zonas maiores.
Organismos exigentes podem não crescer neste meio e podem exigir suplementação de sangue.
Anaróbios exigentes podem não crescer neste meio.
Como a suscetibilidade antimicrobiana é realizada com o disco antibiótico, é desejável o
armazenamento adequado do disco, o que pode afetar a potência do disco.
Sob certas circunstâncias, os resultados in vitro da suscetibilidade a antibióticos podem não
mostrar os mesmos in vivo.
Desempenho e Avaliação
A performance do meio é esperada quando usada de acordo com a direção na etiqueta dentro
do prazo de validade, quando armazenada na temperatura recomendada.
Controle de qualidade
Aparência: Creme para amarelar pó homogêneo de fluxo livre
Gelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,7%.
Cor e clareza do meio preparado: Gel de cor âmbar claro, claro a leve opalescente proveniente
de placas de Petri.
Reação: Reação de solução aquosa a 3,8% p / v a 25 ° C. pH: 7,4 ± 0,1
pH: 7,20-7,50
Resposta cultural: Características culturais observadas após incubação a 30-35 ° C por 18 a 24
horas para culturas bacterianas. Para teste de S.pneumoniae: O meio foi suplementado com 5%
de sangue de ovelha e incubado a 35 ° C por 16-18 horas a 5% de CO2. Para teste de
H.influenaze: O meio foi suplementado com 5g / l de extrato de levedura e 2 frascos para
injetáveis. / l de crescimento de Haemophilus Suplemento (FD117 contendo 15 mg / l de hematina
+ 15 mg / l de NAD) e incubado a 35 ° C por 20-24 horas a 5% de CO2. Teste de sensibilidade a
antibióticos Vários discos foram testados para cepas padrão de ATCC e a zona de inibição foi
medida após uma incubação a 30-35 ° C por 18 horas. (Conforme o mais recente protocolo M6 e
normas CLSI conforme o atual CLSI M100) Conteúdo de timina / timidina
# As zonas desses discos são indicativas do conteúdo de timina / timidina do meio.
Conteúdo de cátions divalentes
$ As zonas para esses discos são indicativas do conteúdo de cátions divalentes do meio.
Resposta cultural
Organismo:Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)
Crescimento: Exuberante
AT