Recomendado para o isolamento, contagem e diferenciação de espécies da familia Enterobacteriaceae em amostras clínicas e não clínicas.Composição**Ingredientes Gms / LitroPeptona 10.000Fosfato dipotássico 2.000Lactose 10.000Eosina - Y 0,400Azul de metileno 0,065Ágar 15.000PH final (a 25 ° C) 7,1 ± 0,2** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho.Instruções:Suspenda 37,46 gramas em 1000 ml de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver completamente o meio. Esterilizar em autoclave a 15 libras de pressão (121 ° C) por 15 minutos. EVITE O SUPERAQUECIMENTO. Arrefecer até 50 ° C e agitar o meio para oxidar o azul de metileno (isto é, restaurar sua cor azul) e suspender o precipitado, que é uma parte essencial do meio. Precaução: Armazene o meio longe da luz para evitar a foto-oxidação.Princípio e InterpretaçãoO Levine EMB Agar foi desenvolvido por Levine (7,8) e é utilizado para a diferenciação de Escherichia coli e Klebsiella aerogenes e também para a identificação rápida de Candida albicans. Este meio é recomendado para a detecção, enumeração e diferenciação de membros do grupo coliforme pela American Public Health Association (2,9,10). Soldar (11,12) propuseram o uso do Levine EMB Agar, com adição de cloridrato de clortetraciclina, para a rápida identificação de Candida albicans em amostras clínicas. Uma identificação positiva de Candida albicans pode ser feita após 24-48 horas incubação a 35-37 ° C em atmosfera de dióxido de carbono a 10%, de amostras como fezes, secreções orais e vaginais e raspagem de unhas ou pele, etc. No entanto, a aparência típica é variável.A eosina Y e o azul de metileno tornam o meio ligeiramente seletivo e inibem certas bactérias gram-positivas. Esses corantes servem como indicadores diferenciais em resposta à fermentação de carboidratos. Isso ajuda a diferenciar entre lactosefermenters e não fermentadores em EMB Agar, Levine. A proporção de azul de eosina-metileno é ajustada para aproximadamente 6: 1.Os coliformes produzem colônias negras arroxeadas devido à absorção do complexo de corante azul de metileno e eosina, quando o pH cai. O complexo de corante é absorvido na colônia. Os não fermentadores provavelmente aumentam o pH do meio circundante por oxidação desaminação de proteínas, que solubiliza o complexo azul de metileno-eosina, resultando na formação de colônias incolores (4) A peptona serve como fonte de carbono, nitrogênio, aminoácidos de cadeia longa, vitaminas e outros nutrientes essenciais para o crescimento.A lactose serve como fonte de energia por ser o carboidrato fermentável. Eosina-Y e azul de metileno servem como indicadores diferenciais. O fosfato protege o meio.A amostra de teste pode ser listada diretamente nas placas médias. As placas inoculadas devem ser incubadas, protegidas da luz. No entanto, procedimentos padrão devem ser seguidos para obter colônias isoladas. Um meio não seletivo deve ser inoculado em conjunto com o EMB Agar. Testes de confirmação devem ser realizados ainda para identificação de colônias isoladas.Tipo de amostra: Amostras clínicas - urina, Alimentos; Amostras de água.Coleta e manuseio de amostras:Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio das amostras, de acordo com as diretrizes estabelecidas (5,6).Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes (1,3,10).Para amostras de água, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes e padrões locais. (2)Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.Aviso e Precauções:Apenas para diagnóstico in vitro. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção / roupas de proteção / proteção para os olhos / proteção para o rosto. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. Precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser referidos nas fichas de dados de segurança individuais.Limitações1. Um meio não seletivo deve ser inoculado em conjunto com o EMB Agar.2. Testes de confirmação devem ser realizados ainda para identificação de colônias isoladas.3. Algumas cepas das espécies de Salmonella e Shigella não crescem na presença de eosina e azul de metileno.Desempenho e AvaliaçãoO desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção na etiqueta dentro do prazo de validade quando armazenado à temperatura recomendada.Controle de qualidadeAparência: Pó de fluxo livre homogêneo rosa claro a roxoGelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%Cor e clareza do meio preparado: Gel opalescente de cor púrpura avermelhada com formas esverdeadas e precipitado finamente disperso em placas de PetriReação: Reação de solução aquosa a 3,75% p / v a 25 ° C. pH: 7,1 ± 0,2pH: 6,90-7,30Resposta culturalCaracterísticas culturais observadas após uma incubação a 35-37 ° C por 24-48 horas.Resposta culturalOrganismo: Candida albicans ATCC 10231 Inoculação: 50-100Crescimento: Exuberante (Incubado em 10% de Dióxido de Carbono)Recuperação:>=50%Cor da Colônia: IncolorOrganismo: Enterobacter aerogenes ATCC 13049 (00175*)Inoculação: 50-100Crescimento: BomRecuperação:40-50%Cor da Colônia: Rosa AvermelhadoOrganismo: Escherichia coli ATCC 25923 (00013*) Inoculação: 50-100Crescimento: ExuberanteRecuperação: >=50%Cor da Colônia: Azul-preto com brilho metálicoOrganismo: Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*) Inoculação: 50-100Crescimento: NenhumRecuperação: <=10%Cor da Colônia: IncolorOrganismo: Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (00025*) Inoculação: 50-100Crescimento: ExuberanteRecuperação: >=50%Cor da Colônia: IncolorOrganismo: Staphylococcus aureus ATCC 6538 (00032*) Inoculação:50-100Crescimento: NenhumRecuperação: <=10%Cor da Colônia: IncolorOrganismo: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 (00026*) Inoculação: 50-100Crescimento: ExuberanteRecuperação: >=50%Cor da Colônia: IncolorOrganismo: Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*) Inoculação: 50-100Crescimento: ExuberanteRecuperação: >=50%Cor da Colônia: IncolorOrganismo: Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763Inoculação: 50-100Crescimento: NenhumRecuperação: <=10%Cor da Colônia: CremeOrganismo:Staphylococcus aureus ATCC 25923 (00058*)Inoculação: 50-100Crescimento: NenhumRecuperação: <=10%Cor da Colônia:IncolorOrganismo: Escherichia coli NCTC 90002 Inoculação: 50-100Crescimento: ExuberanteRecuperação: >=50%Cor da Colônia: Azul-preto com brilho metálicoOrganismo: Escherichia coli ATCC 8739 (00012*)Inoculação:50-100Crescimento: ExuberanteRecuperação: >=50%Cor da Colônia: Azul-preto com brilho metálicoArmazenamento e prazo de validade: Armazenar abaixo de 30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 20-30°C. Use antes da data de validade no rótulo. Em abertura, o produto deve ser adequadamente armazenado seco, depois de fechar firmemente a garrafa, a fim de evitar a formação de caroços devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazenar em área ventilada e seca protegido de temperaturas extremas e fontes de ignição. Feche o recipiente firmemente após o uso. Use antes da data de validade no rótulo. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado.Descarte: O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Segue procedimentos laboratoriais estabelecidos na eliminação de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra deve ser descontaminada e descartada de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (5,6)