INFORMAÇÕES SOBRE O PRODUTO

AG-5073 - ÁGAR TCBS (M189)

USO PRETENDIDO
Recomendado para o isolamento seletivo e cultivo de Vibrio cholerae e outros Vibrios enteropatogênicos causadores de intoxicação alimentar de amostras clínicas e de alimentos.

COMPOSIÇÃO**
Ingredientes (g/L)
Proteose peptona: 10,000
Extrato de levedura: 5,000
Tiossulfato de sódio: 10,000
Citrato de sódio: 10,000
Bile: 8,000
Sacarose: 20,000
Cloreto de sódio: 10,000
Citrato férrico: 1,000
Azul de bromotimol: 0,040
Azul de timol: 0,040
Agar: 15,000
pH final (a 25°C): 8,6 ±0,2
**Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho

INSTRUÇÕES
Suspender 89,08g em 1000mL de água purificada/destilada. Aqueça até a ebulição para dissolver o meio completamente. NÃO AUTOCLAVE. Resfrie a 45°C - 50°C. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.

PRINCIPIO E INTERPRETAÇÃO
O Ágar TCBS foi desenvolvido por Kobayashi et. al.(1), que modificou o meio seletivo de Nakanishi (2). Embora este meio tenha sido originalmente projetado para o isolamento de V. cholerae e V. parahaemolyticus, a maioria dos Vibrios crescem em grandes colônias saudáveis com muitas morfologias coloniais diferentes. O Ágar TCBS também é recomendado pela APHA para o isolamento seletivo de V. cholerae e V. parahaemolyticus (3,4). Enriquecimento em
Água Peptonada Alcalina (M618), seguido de isolamento em Ágar TCBS é rotineiramente usado para isolamento de V.cholerae (5,6,7).
Proteose peptona e extrato de levedura fornecem compostos nitrogenados, vitaminas do complexo B e outros nutrientes essenciais para o crescimento.
A bile, um derivado de sais biliares e citrato de sódio, inibe bactérias gram-positivas e coliformes (8). O tiossulfato de sódio serve como uma boa fonte de
enxofre, que em combinação com o citrato férrico detecta a produção de sulfeto de hidrogênio. Para o metabolismo do Vibrio, a sacarose é adicionada como
um carboidrato fermentável. O Vibrio que é capaz de utilizar sacarose irá de colônias amarelas. Azul de bromotimol e azul de timol são os indicadores de pH.
O pH alcalino do meio melhora a recuperação de V.cholerae. Cepas de V. cholerae produzem colônias amarelas no Ágar TCBS devido à fermentação da sacarose.
V. alginolyticus também produz colônias amarelas. V.parahaemolyticus é um organismo não fermentador de sacarose e, portanto, produz colônias verde-azuladas, assim como V.vulnificus.

TIPO DE AMOSTRA
Clínica: fezes, etc; Amostras de alimentos; Amostras de água.

COLETA E MANUSEIO DE AMOSTRA
Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para manusear amostras de acordo com as diretrizes estabelecidas (7,8).
Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras de acordo com as diretrizes (4,9,10).
Para amostras de água, siga as técnicas apropriadas para coleta de amostras, processamento de acordo com as diretrizes e padrões locais (3).
Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

AVISO E PRECAUÇÕES
Uso diagnóstico in vitro. Apenas para uso profissional. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção/ vestuário de proteção/
proteção ocular/ proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear espécimes e cultura.
As precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas.
As orientações de segurança podem ser referidas em fichas de dados de segurança individuais.

LIMITAÇÕES
1. O meio deve ser inoculado fortemente com amostras fecais porque o crescimento de algumas espécies pode ser inibido no meio devido à fermentação da sacarose e acúmulo de ácidos.
2. Entretanto, isolados ocasionais de Pseudomonas e Aeromonas também podem formar colônias verde-azuladas em Ágar TCBS (11).
3. Espécies de Proteus que são fermentadoras de sacarose podem formar colônias amarelas (11).
4. O Ágar TCBS não é um meio adequado para testes de oxidase de espécies de Vibrio (12).
5. Algumas cepas de V. cholerae podem aparecer verdes ou incolores no Ágar TCBS devido à fermentação retardada da sacarose (11).
6. O Ágar TCBS é altamente seletivo para espécies de Vibrio. Qualquer colônia H2S negativa de Ágar TCBS pode ser considerada positiva presuntiva para Vibrio.
7. Outros testes bioquímicos e sorológicos devem ser realizados para identificação completa.

DESEMPENHO E AVALIAÇÃO
O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com as instruções no rótulo dentro do período de validade quando armazenado na
temperatura recomendada.

CONTROLE DE QUALIDADE
Apariência:
Pó de fluxo livre homogêneo amarelo claro a bronzeado claro

Gelificação:
Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%

Cor e clareza do meio preparado:
Formas de gel transparentes a levemente opalescentes de cor verde azulada em placas de Petri.

Reação:
Reação de solução aquosa 8,9% p/v a 25°C. pH: 8,6±0,2

pH:
8.40-8.80

Resposta cultural:
Características culturais observadas após incubação a 35°C - 37°C por 18-24 horas.

-PRODUTIVIDADE

ORGANISMO: Vibrio parahaemolyticus NCTC 10885 (00185*)
INÓCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO: Bem abundante
RECUPERAÇÃO: >=50%
COR DA COLÔNIA: Azul

ORGANISMO: Vibrio furnissii NCTC 11218 (00186*)
INÓCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO: Bem abundante
RECUPERAÇÃO: >=50%
COR DA COLÔNIA: Amarelo esverdeado

-ESPECIFICIDADE

ORGANISMO: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*)
INÓCULO (UFC): >=10^4
CRESCIMENTO: Inibido
RECUPERAÇÃO: 0%
COR DA COLÔNIA: -

ORGANISMO: Escherichia coli ATCC 8739 ( 00012*)
INÓCULO (UFC): >=10^4
CRESCIMENTO: Inibido
RECUPERAÇÃO: 0%
COR DA COLÔNIA: -

ORGANISMO: Escherichia coli ATCC 11775( 00090*)
INÓCULO (UFC): >=10^4
CRESCIMENTO: Inibido
RECUPERAÇÃO: 0%
COR DA COLÔNIA: -

-TESTES MICROBIOLÓGICOS ADICIONAIS

ORGANISMO: Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802 (00037*)
INÓCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO: Bem abundante
RECUPERAÇÃO: >=50%
COR DA COLÔNIA: Azul

ORGANISMO: Vibrio cholerae ATCC 15748
INÓCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO: Bem abundante
RECUPERAÇÃO: >=50%
COR DA COLÔNIA: Amarelo

ORGANISMO: Vibrio fluvialis ATCC 33809 (00137*)
INÓCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO: Bem abundante
RECUPERAÇÃO: >=50%
COR DA COLÔNIA: Amarelo

ORGANISMO: Vibrio vulnificus ATCC 29306
INÓCULO (UFC): 50-100
CRESCIMENTO: Razoável/Bom
RECUPERAÇÃO: >=20%
COR DA COLÔNIA: Amarelo esverdeado