Tricrômico de Masson Modificado (com verde luz) - Masson Trichrome (with green light)

Código EP-11-20453

* Quantidade de testes : mínimo de 60 testes*

* Tempo total do procedimento : 30 minutos

* Validade do produto : ver frasco

* Temperatura de armazenamento : 15 a 25°C (temperatura ambiente)

* Equipamentos complementares : Não necessita

Aplicação

Método recomendado para tecido conjuntivo. Demonstra gametas, núcleos, neurofibrilas, neuroglia, colágeno, ceratina, fibrilas intracelulares, imagem negativa do complexo de Golgi.

Princípio

São utilizados três diferentes corantes: hematoxilina férrica de Weigert para núcleos, uma mistura de corantes ácidos (fucsina ácida-”vermelho de xilidina”) para citoplasma e azul de anilina para tecido conjuntivo.

Método

1. Desparafinizar as lâminas em xilol por 5 minutos. Após hidratar as lâminas em álcool 99%, 95%, 70% e lavar em água corrente.
2. Levar as seções de tecidos em água destilada e após secar as lâminas.
3. Em um becker pequeno fazer a junção dos reagentes A + B na seguinte proporção: 10 gotas do reagente A + 10 gotas do reagente B. Cubrir o tecido com a solução obtida com esta junção. Deixar agir por 10 minutos.
4. Lavar as lâminas em água corrente e secar.
5. Colocar na seção de tecido 10 gotas do reagente C. Deixar agir por 4 minutos.
6. Lavar as lâminas em água corrente e colocar na seção de tecido 10 gotas (ou o suficiente apenas para cobrir o corte) do reagente D. Deixar agir por 5 minutos.
7. Secar as lâminas sem lavá-las e colocar na seção de tecido 10 gotas (ou o suficiente apenas para cobrir o corte) do reagente E. Deixar agir por 5 minutos.
8. Lavar em água destilada e desidratar rapidamente em série de álcool ascendente até o xilol e montar as lâminas com ERV-MOUNT.

* Quantidade de teste estimada conforme o tamanho do tecido a ser corado, quanto maior o tecido maior será o volume necessário para realizar a coloração e menor será a quantidade de testes. Veja maiores detalhes no verso “INSTRUÇÕES GERAIS”.

Resultados (veja item coloração final no verso “INSTRUÇÕES GERAIS)

Núcleos e gametas......................................................................................…..................................................................................... preto
Citoplasma, ceratina, fibras musculares, acidófilo....................................................................................................................... vermelho
Colágeno, muco, grânulos basófilos da hipófise.........................................…..............................................................................….….verde
Grânulos das células delta da hipófise .......................................................…......................................................................................verde

Reagentes

A (tampa preta) - Hematoxilina férrica de Weigert – sol. A...........30 ml D (tampa branca) - Ácido fosfomolíbdico ….................30 ml
B (tampa azul) - Hematoxilina férrica de Weigert – sol. B …….......30 ml E (tampa verde) – Verde luz….…...................................30 ml
C (tampa vermelha) - Fucsina …...........................................….......30 ml

Referências

Masson PJ. Some histological methods: trichrome stainings and their preliminary technique. 1929 J. Tech. Methods, 12: 75-90.
Lillie RD. Staining of connettive tissue . Arch Pat 1951; 54:220-223.
Lillie RD. Studies on selective staining of collagen with acid anilin dyes. J Tech Methods 1945; 25: 1-47.
Lillie RD. Further experiments with the Masson trichrome modification of Mallory’s connective tissue stain. Stain Technol 1940; 15: 82.
Armed Forces Institute of Pathology: Laboratory Methods in histotechnology. Washington D.C., A.F.I.P., 1994.

MS 10039370005