Fontana Masson Modificado (com verde luz) Masson Fontana (with green light)

Código EP-12-20451

· Quantidade de testes : mínimo de 60 testes*

· Tempo total do procedimento : 40 minutos

· Validade do produto : ver frasco

· Temperatura de armazenamento : 4 a 8ºC (geladeira)

· Equipamentos complementares : Não necessita

Aplicação

Para demonstração de Pigmentos de Melanina.

Princípio

A melanina e as granulações das células argentafins intestinais são constituídas por corpos polifenólicos que tem a propriedade de se combinar com os sais de prata e de reduzir no estado metálico sem a necessidade da interferência de um redutor químico.

Método

1. Desparafinizar as lâminas em xilol por 5 minutos. Após hidratar as lâminas em álcool 99%, 95%, 70% e lavar em águadestilada.
2. Secar as lâminas.
3. Preparar o reagente A em um “Becker” ou outro recipiente termo-resistente na seguinte proporção: 40ml de água destilada para 40 gotas da solução A, ou proporcionalmente. Deixar agir em estufa por aproximadamente 35 minutos à 56ºC.
4. Lavar as lâminas em água destilada por aproximadamente 3 minutos.
5. Colocar na seção de tecido 10 gotas do reagente B (ou o suficiente apenas para cobrir o corte), deixar agir por 15 segundos.
6. Lavar as lâminas em água destilada.
7. Colocar na seção de tecido 10 gotas do reagente C (ou o suficiente apenas para cobrir o corte), deixar agir por 3 minutos.
8. Lavar as lâminas em água destilada.
9. Colocar na seção de tecido 10 gotas do reagente D (ou o suficiente apenas para cobrir o corte), deixar agir por 1 minuto.
10. Desidratar em série de álcool ascendente até o xilol e montar as lâminas com ERV-MOUNT.

Quantidade de teste estimada conforme o tamanho do tecido a ser corado, quanto maior o tecido maior será o volume necessário para realizar a coloração e menor será a quantidade de testes. Veja maiores detalhes no verso “INSTRUÇÕES GERAIS”

OBS. A junção da água destilada/deionizada com o reagente A dever ser utilizada apenas uma vez e descartada, recomendamos que seja feita no mínimo 2 lâminas por reação para rendimento mínimo de 60 testes.

Resultados (veja item coloração final no verso “INSTRUÇÕES GERAIS)

Pigmentos de melanina..............................................................................preto
Fundo.....................................................................................................….verde

Reagentes

A (tampa preta) - Prata amoniacal.............……........................2 x 30 ml
B (tampa amarela) - Cloreto de ouro.......…...….........................….30 ml
C (tampa branca) - Tiossulfato.................…….........................…....30 ml
D (tampa verde) - Verde luz.........................……............................30 ml

Referências

Berg JW. Acid-fastness as a histochemical test J Histochem Cytochem 1953; 1: 436-441
Berg JW. Chemistry of acid-fastness Proc Soc Exp Biol Med 1953; 84: 196-198
Lillie RD. Acetic methylene blue counterstain in staining tissue in acid fast bacilli. Stain Technol 1944; 19-45.

MS 10039370005.