APRESENTAÇÃO

Frascos com 10 mL.

INTRODUÇÃO

O Bio PeG® reúne o polietilenoglicol e um meio de baixa força iônica. Esta combinação leva ao aumento da sensibilidade na detecção de anticorpos irregulares IgG. Os anticorpos IgG por serem monômeros necessitam de potencializadores para determinarem a aglutinação in vitro. O polietilenoglicol ou PEG foi descrito por Nance e Garraty como potencializador das reações antígeno-anticorpo. No teste indireto da antiglobulina humana, a utilização do PEG determina maior sensibilidade na detecção de anticorpos IgG quando comparado com o uso da albumina bovina a 22%. O Polietilenoglicol, em sua formulação original, é preparado em uma solução salina fosfatada tamponada de força iônica normal. Para execução do teste nesta formulação, são necessárias 4 gotas de Polietilenoglicol para 2 gotas de soro e 1 gota de suspensão de hemácias. Quando o Polietilenoglicol é associado a um meio de baixa força iônica, somente 2 gotas da solução são necessárias. Contém azida sódica como preservante com concentração final 0,1%, apesar disso deve ser manuseado evitando-se contaminação grosseira do reagente.

PRINCÍPIO DO TESTE

O Bio PeG® é um potencializador utilizado na pesquisa e identificação de anticorpos anti-eritrocitários ou em provas de compatibilidade. O tempo de incubação é diminuído, pois a interação antígeno-anticorpo é facilitada pela ação do polietilenoglicol que retira moléculas de água que circundam as hemácias e pelo meio de baixa força iônica que provoca o aumento do potencial zeta determinando o afastamento das hemácias. Esta associação facilita a sensibilização das hemácias por anticorpos IgG.

COLETA E PREPARO DA AMOSTRA

Não é necessário nenhum preparo especial do paciente ou doador para a coleta da amostra. - O sangue deve ser coletado com técnica asséptica e o soro ou plasma separado o mais breve possível. - As amostras devem ser estocadas entre 2ºC a 8ºC, se não forem analisadas de imediato. - O Bio PeG® também pode ser usado como potencializador nos testes com eluatos. Reagentes adicionais: - Reagente de Glóbulos Vermelhos para Detecção (Triacel®) ou Identificação (Painel de Hemácias BSA®) de Anticorpos; - Antiglobulina Humana (Soro de Coombs BSA®); - Células controle de Coombs (Controcel®); - Solução Fisiológica. Materiais e equipamentos necessários: - Tubos de ensaio (10 x75 mm ou 12 x 75 mm); - Pipetas Pasteur; - Banho-maria; - Timer; - Centrífuga.

PROCEDIMENTO 1. Dispensar 2 gotas* de soro, plasma ou eluato a ser testado em um tubo de ensaio devidamente identificado; 2. Adicionar 1 gota* de suspensão de 3 a 5% de hemácias. Na pesquisa e identificação de anticorpos irregulares, utilizar o Triacel® e o Painel de Hemácias BSA®. No caso de prova de compatibilidade, utilizar hemácias do segmento da bolsa de concentrado de hemácias; 3. Homogeneizar e centrifugar os tubos durante 15 segundos a 3.400 rpm (900 a 1000g) ou 1 minuto a 1.000 rpm (100-125g); 4. Ressuspender delicadamente o “botão” de hemácias em cada tubo, observando a presença ou não de hemólise e/ou aglutinação; 5. Anotar os resultados; 6. Adicionar a cada tubo 2 gotas* de Bio PeG® e homogeneizar; 7. Não centrifugar, passar diretamente para a fase de incubação a 37o C durante 15 minutos; 8. Lavar o conteúdo dos tubos 3 vezes com solução fisiológica. Decantar completamente a solução fisiológica após a última lavagem; 9. Adicionar aos tubos, 2 gotas* de SORO DE COOMBS BSA®. Homogeneizar; 10. Anotar os resultados.

VALIDAÇÃO DO TESTE Adicionar aos tubos com resultado negativo, 1 gota* de CONTROCEL® como controle de qualidade da técnica de lavagem e da atividade do SORO DE COOMBS BSA® (ver “Instruções para uso” do Controcel®). * 1 gota = aproximadamente 50 microlitros.

INTERPRETAÇÃO 1. A presença de aglutinação e ou hemólise na leitura imediata a temperatura ambiente corresponde a um resultado positivo e indica a presença de anticorpos IgM contra antígenos presentes naquela hemácia. 2. A presença de aglutinação e ou hemólise após a adição da Antiglobulina Humana corresponde a um resultado positivo e indica a presença de anticorpos IgG contra antígenos presentes naquela hemácia. 3. A ausência de aglutinação em cada fase corresponde a um resultado negativo e indica a ausência de anticorpos irregulares.

PRECAUÇÕES 1. Os glóbulos vermelhos suspensos em soro ou plasma e Bio PeG® tendem a ser agregados pela característica do Polietilenoglicol, tornando impossível examinar a presença de aglutinação antes de proceder à lavagem das hemácias. 2. Foram observadas reações inespecíficas na detecção de anticorpos irregulares quando utilizado o Soro Anti-Humano poliespecífico e Bio PeG®. Por isso, é recomendado somente o uso de antiglobulina humana anti-IgG (Soro de Coombs BSA®). 3. Em nossas experiências, a incidência de reações inespecíficas varia amplamente entre reagentes Antiglobulinas Humanas poliespecíficas de diferentes procedências e, igualmente, de lote para lote. Desta maneira, o uso de Anti-IgG é fortemente recomendado. 4. Os resultados de todos os ensaios devem ser interpretados logo após o término do teste. 5. Em todos os procedimentos sorológicos, materiais contaminados, tempo de incubação impróprio, temperatura inadequada, centrifugação ineficaz ou excessiva, podem levar a falsos resultados.

LIMITAÇÃO Bio PeG® não é indicado para detecção de anticorpos IgM.

CARACTERÍSTICAS DO PRODUTO Cada lote é testado sorologicamente com anticorpos selecionados e com amostras de soros humanos inertes para assegurar um bom desempenho do produto. Este produto é garantido pelo fabricante, se conservado e utilizado conforme indicado em seu rótulo e instruções de uso. Reagente diagnóstico para uso “in vitro”.