Descrição:

O BRAZOL é um reagente utilizado no isolamento de RNA a partir de amostras de células e tecidos.

O BRAZOL é a versão otimizada do popular método passo-único de isolamento total de RNA, baseado na metodologia desenvolvida por Chomczynski & Sachi (1, 2, 3).

Esta metodologia de extração tem se mostrado altamente eficaz na purificação de ácidos nucléicos a partir de materiais biológicos, tais como: soro, plasma, sangue total coletado ou não com EDTA, células obtidas a partir de cultivos e/ou tecidos congelados.

O protocolo a seguir foi padronizado para aplicação em protocolos de amplificação e outras técnicas comuns em laboratórios de Biologia Molecular.

Esta técnica é confiável e possui bom desempenho para diferentes quantidades de amostras.

O BRAZOL combina as propriedades do fenol e do isotiocianato de guanidina, que inibem imediata e efetivamente a atividade da enzima RNAse.

As células presentes na amostra biológica são lisadas através deste reagente e, após homogeneização e adição de clorofórmio e posterior centrifugação, o produto resultante é separado em duas fases visíveis: aquosa e orgânica, respectivamente.

O RNA permanece exclusivamente na fase aquosa, o DNA pode ser encontrado na interfase entre a fase orgânica e a fase aquosa e as proteínas exclusivamente na fase orgânica (azul).

O RNA pode ser precipitado através da adição de isopropanol gelado seguido de lavagens com etanol 70% e dissolvido em água ou tampão TE.

O DNA e as proteínas podem ser precipitados através da adição de etanol e isopropanol, seguido de lavagem com etanol.

Precauções especiais de manuseio: O BRAZOL contém fenol (tóxico) e isotiocianato de guanidina (cáustico) que podem provocar queimaduras e, se ingerido, pode ser fatal.

Ao empregá-lo em rotinas laboratoriais utilize sempre luvas, avental e protetor para os olhos.

Evite o contato com a pele ou com a roupa e não inale seu vapor.

Leia as notas de advertência contidas no frasco que acondiciona o produto.