TAQ DNA Polimerase + Buffer + Mgcl2 - Enzima Para PCR - 50 Reações - POL-101XS
Código: 16954
Taq Pol Master mix 2X contém Taq DNA Polimerase em tampão otimizado contendo Mg2+ e dNTPs.
Contém todos os reagentes requeridos para realização da PCR (com exceção dos oligonucleotídeos e DNA molde) em forma de mix 2X concentrado e pronto para uso.
Deve ser empregado na concentração de 1X em reações de de 25 a 50 µL.
O Master mix é recomendado para reações de PCR rotina a partir de soluções puras de DNA, colônias bacterianas e cDNA.
É otimizado para alta especificidade, garantido o mínimo de formação de subprodutos.
CONTEÚDO
Taq Pol Master Mix 2X (tampa verde)
Master mix contendo DNA polimerase termoestável, dATP, dCTP, dGTP, dTTP, KCl, MgCl2 e estabilizantes.
PROTOCOLO
Apenas para uso in vitro!
Ensaio recomendado: 50 µL
| Componente | [ final ] | Volume |
| Taq Pol Master Mix 2X | 25 µL | 1 X |
| 10 µM Oligonucleotídeo senso | 1 µL | 0.2 µM |
| 10 µM Oligonucleotídeo antisenso | 1 µL | 0.2 µM |
| DNA molde | variável | 10 pg - 1 µg** |
| Água grau PCR | q.s.p 50 µL | |
**DNA genômico: 1 ng-1μg; DNA plasmidial ou viral: 1 pg-1 ng
Condições de ciclagem recomendadas
| Denaturação inicial | 95 °C | 1 min | 1 X |
| Denaturação | 95 °C | 15-30 s | 30 X |
| Hibridização1 | 45-68 °C | 15-30 s | |
| Elongação2 | 72 °C | 30 s - 4 min | |
| Elongação final | 72 °C | 2 min | 1 X |
1 A temperatura de hibridização depende da temperatura denaturação (melting) do oligonucleotídeo empregado.
2 O tempo de elongação depende do tamanho do fragmento que se pretende amplificar. Recomenda-se 1 min por kb.
TRANSPORTE E ARMAZENAGEM
Transportado em blue ice
Armazenada à -20 °C. Evite ciclos de congelamento/descongelamento.
Taq Pol Master Mix 2X é estável por até 3 meses a 4ºC
