Envio: Enviado à temperatura ambiente

Validade: 24 meses

Concentração: 10.000X

Propriedades espectroscópicas: λexc 309 e 419 nm; Em 514 nm

Formulários:
- Utilizado para detecção de DNA de fita dupla e RNA de fita simples
- Alternativa à coloração com brometo de etídio
- Tão sensível quanto o brometo de etídio ou mais sensível
- Não tóxico, não mutagênico e não carcinogênico
- Sem resíduos perigosos

Descrição:
O corante Safedye para ácidos nucleicos (10.000x) é um novo e seguro corante para ácidos nucleicos, uma alternativa ao tradicional brometo de etídio (EtBr) para detecção de ácidos nucleicos em géis de agarose. Ele emite fluorescência verde quando ligado ao DNA ou RNA. Este novo corante apresenta dois máximos de excitação de fluorescência quando ligado ao ácido nucleico, um centrado em 309 nm e outro em 419 nm. Além disso, possui uma excitação visível em 514 nm. A emissão de fluorescência do Safedye ligado ao DNA está centrada em 537 nm. O corante Safedye para ácidos nucleicos (10.000x) é tão sensível quanto o EtBr. O protocolo de coloração para o corante Safedye para ácidos nucleicos (10.000x) é semelhante ao do EtBr. Em comparação com o brometo de etídio (EtBr), conhecido por ser um forte
mutagénico, o corante para ácidos nucleicos Safedye causa muito menos mutações no teste de Ames. Além disso,
o corante para ácidos nucleicos Safedye (10.000x) apresenta resultado negativo no teste de micronúcleos em eritrócitos cromofílicos da medula óssea de camundongos e no teste de aberração cromossômica em espermatócitos de camundongos. Portanto, é aconselhável escolher o corante para ácidos nucleicos Safedye (10.000x) em vez do EtBr para a detecção de ácidos nucleicos em géis de agarose.

Protocolo sugerido:
1. Prepare 100 ml de solução de gel de agarose (concentração de 0,8 a 3%) em um frasco de 250 ml e misture bem. Coloque o frasco no micro-ondas e aqueça até que a solução esteja completamente transparente e pequenas partículas flutuantes sejam visíveis (cerca de 2 a 3 minutos).
Observação: A espessura do gel deve ser inferior a 0,5 cm, pois géis espessos podem diminuir a sensibilidade.

2. Adicione 10 μL de corante para ácidos nucleicos Safedye (10.000x) à solução de agarose. Agite o frasco suavemente para misturar a solução e evitar a formação de bolhas.

3. Enquanto a solução de agarose esfria, despeje-a na bandeja de gel até que os dentes do pente estejam imersos em cerca de 1/4 a 1/2 da agarose.
Observação: A fusão repetida de géis contendo o corante Safedye Nucleic Acid Stain (10.000x) pode resultar em baixa sensibilidade.

4. Deixe o gel de agarose esfriar até solidificar. Coloque as amostras no gel e realize a eletroforese.

5. Detecte as bandas sob iluminação UV.
Nota: O corante Safedye para ácidos nucleicos (10.000x) permite a visualização de DNA (>50 ng) no gel de agarose sob luz visível. Isso elimina a necessidade de exposição à luz UV, que pode causar quebras e danos ao DNA. Os fragmentos de DNA intactos purificados do gel de agarose podem aumentar a eficiência de manipulações subsequentes de biologia molecular, como clonagem, transformação e transcrição.